總大腸菌群 | 濾膜法與紙片快速法

總大腸菌群是作(zuò)為(wèi)糞便污染指标菌提出來的，主要是以該菌群的檢出情況來表示水中(zhōng)是否有(yǒu)糞便污染。總大腸菌群數的高低，表明了糞便污染的程度，也反映了對人體(tǐ)健康危害性的大小(xiǎo)。糞便是人類腸道排洩物(wù)，糞便内除一般正常細菌外，也會有(yǒu)一些腸道緻病菌存在（如沙門氏菌、志(zhì)賀氏菌等），因而水中(zhōng)有(yǒu)糞便污染，則可(kě)以推測該水存在着腸道緻病菌污染的可(kě)能(néng)性，必須看作(zuò)對人體(tǐ)健康具(jù)有(yǒu)潛在的危險性。

目前，用(yòng)于檢測大腸菌群的方法有(yǒu)多(duō)管發酵法、濾膜法、紙片快速法、酶底物(wù)法等。但是小(xiǎo)編發現在行業存在将濾膜法和紙片快速法弄混的現象，認為(wèi)紙片法是不用(yòng)抽濾的濾膜法，其實這是兩個完全不同的檢測方法，今天我們來了解一下這兩個方法的基本原理(lǐ)、操作(zuò)步驟及優缺點等。

用(yòng)孔徑為(wèi) 0.45 μm 的微孔濾膜過濾水樣後,将濾膜貼在選擇性培養基上培養後，能(néng)形成典型菌落經革蘭氏染色和證實試驗，來檢測水中(zhōng)總大腸菌群的方法。

圖 2 濾膜法操作(zuò)步驟

紙片快速法

按最大可(kě)能(néng)數（MPN）法，将一定量的水樣以無菌操作(zuò)的方式接種到吸附有(yǒu)适量指示劑（溴甲酚紫和2，3，5-氯化三苯基四氮唑即TTC）以及乳糖等營養成分(fēn)的無菌濾紙上，在特定的溫度（37℃）培養18-24h，當細菌生長(cháng)繁殖時，産(chǎn)酸使pH值降低，溴甲酚紫指示劑由紫色變黃色，同時，産(chǎn)氣過程相應的脫氫酶在适宜的pH範圍内，催化底物(wù)脫氫還原TTC形成紅色的不溶性三苯甲臜（TTF），即可(kě)在産(chǎn)酸後的黃色背景下顯示出紅色斑點（或紅暈）。通過上述指示劑的顔色變化就可(kě)對是否産(chǎn)酸産(chǎn)氣作(zuò)出判斷，從而确定是否有(yǒu)總大腸菌群存在，再通過查MPN表就可(kě)得出相應總大腸菌群的濃度值。